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Nike Air Max 95 Ebay fluorescente verde GFP di Aequorea victoria

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Contesto: L'amplificazione di oncogeni nelle cellule tumorali è spesso mediata da organismi cromatina acentrici coppie chiamate cromosomi doppi minuti (DMS), che possono accumularsi a un alto numero di copie per la loro replicazione Air Max 1 Ebay autonoma durante la fase di sintesi del DNA del ciclo cellulare e la loro successiva distribuzione non uniforme alle cellule figlie durante la mitosi. I meccanismi che controllano DM Nike Air Max 95 Ebay segregazione sono stati difficili da studiare, tuttavia, come la visualizzazione diretta del DM in cellule viventi è stata esclusa perché sono molto più piccole di quelle cromosomi normali. Abbiamo visualizzato DM attraverso lo sviluppo di un metodo altamente sensibile per osservare la dinamica dei cromosomi nelle cellule viventi. Risultati : Il gene dell'istone H2B umano è stato fuso al gene che codifica per la proteina fluorescente verde (GFP) di Aequorea victoria e trasfettati in cellule HeLa umane per generare una linea stabile che esprime costitutivamente H2B-GFP. La proteina di fusione H2B-GFP è stata incorporata in nucleosomi senza influenzare la progressione del ciclo cellulare. Usando la microscopia confocale, H2B-GFP ha permesso imaging ad alta risoluzione di entrambi i cromosomi mitotici e interfase cromatina, e quest'ultimo ha rivelato vari stati di condensazione della cromatina in cellule vive. Utilizzando H2B-GFP, abbiamo potuto osservare direttamente DM nel vivere le cellule tumorali; DM spesso cluster durante l'anafase, e potrebbe costituire cromosomiche 'ponti' tra cromosomi segregante figlia. Citochinesi tagliato i ponti DM, con la conseguente distribuzione non uniforme del DM alle cellule figlie. Conclusioni : Il sistema di H2B-GFP permette l'imaging ad alta risoluzione di cromosomi, tra cui DM, senza compromettere le strutture nucleari e cromosomiche e ha rivelato il comportamento di clustering distintivo di DM in cellule mitotiche che contribuisce alla loro distribuzione asimmetrica alle cellule figlie.
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